强奷乱码中文字幕乱老妇-中文字幕人妻无码一夲道-国产精品无码久久综合-18禁成年免费无码国产-欧美疯狂黑人xxxxbbbb

技術(shù)文章您的位置:網(wǎng)站首頁 >技術(shù)文章 >膠體金檢測的檢測原理和常用檢測

膠體金檢測的檢測原理和常用檢測

更新時(shí)間:2019-03-22   點(diǎn)擊次數(shù):5842次

膠體金是種常用的標(biāo)記,是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的種新型的免疫標(biāo)記,有其的優(yōu)點(diǎn)。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡幾乎都使用其標(biāo)記。同時(shí)在式、電鏡、免疫、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能例用到。

 

檢測原理

膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,可聚合成定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為種穩(wěn)定的膠體狀態(tài),形成帶負(fù)電的疏水膠溶液,由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài),故稱膠體金。膠體金在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷,可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合,由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合,所以不影響蛋白質(zhì)的生物性。

膠體金除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外,還可以與許多其它生物大分子結(jié)合,如SPA、PHA、ConA等。根據(jù)膠體金的些物理性狀,如電子密度、顆粒大小、形狀及顏色反應(yīng),加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)性,因而使膠體金廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等域。

膠體金標(biāo)記,實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過程。吸附機(jī)理可能是膠體金顆粒表面負(fù)電荷,與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑、也就是不同顏色的膠體金顆粒。這種形的粒子對蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附能,可以與葡萄菌A蛋白、免疫蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價(jià)結(jié)合,因而在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)中成為非常有用的具。

免疫金標(biāo)記(Immunogold labelling techique) 主要利用了金顆粒具有電子密度的性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn),因而用于定性或半定量的快速免疫檢測方法中,這反應(yīng)也可以通過銀顆粒的沉積被放大,稱之為免疫金銀染色。

常用檢測

免疫膠體金光鏡染色法

細(xì)胞懸液涂片或組織切片,可用膠體金標(biāo)記的抗體行染色,也可在膠體金標(biāo)記的基礎(chǔ)上,以銀顯影液增強(qiáng)標(biāo)記,使被還原的銀原子沉積于已標(biāo)記的金顆粒表面,可明顯增強(qiáng)膠體金標(biāo)記的敏感性。

免疫膠體金電鏡染色法

可用膠體金標(biāo)記的抗體或抗抗體與負(fù)染病毒樣本或組織薄切片結(jié)合,然后行負(fù)染??捎糜诓《拘螒B(tài)的觀察和病毒檢測。

斑點(diǎn)免疫金滲濾法

應(yīng)用微孔濾膜(如膜)作載體,將抗原或抗體點(diǎn)于膜上,封閉后加待檢樣本,洗滌后用膠體金標(biāo)記的抗體檢測相應(yīng)的抗原或抗體。

膠體金免疫層析法

將異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上,膠體金標(biāo)記試劑(抗體或單克隆抗體)吸附在結(jié)合墊上,當(dāng)待檢樣本加到試紙條端的樣本墊上后,通過毛細(xì)作用向前移動,溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng),再移動至固定的抗原或抗體的區(qū)域時(shí),待檢物與金標(biāo)試劑的結(jié)合物又與之發(fā)生異性結(jié)合而被截留,聚集在檢測帶上,可通過肉眼觀察到顯色結(jié)果。該法現(xiàn)已發(fā)展成為診斷試紙條,使用十分方便。

快速金標(biāo)試劑

是將異的抗體固定于酸類纖維素膜的某區(qū)帶,當(dāng)該干燥的酸類纖維素端浸入樣品(尿液或血清)后,由于毛細(xì)管作用,樣品將沿著該膜向前移動,當(dāng)移動至固定有抗體的區(qū)域時(shí),樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生異性結(jié)合。同時(shí)利用金粒具有電子密度的性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處。當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),肉眼可見紅色的斑點(diǎn)。既為快速的金標(biāo)檢測方法原理。快速而試劑,要點(diǎn)在于所采用的單克隆抗體、多元克隆抗體、抗原、半抗原、蛋白嵌合物及膠體金等原料的靈敏性及異性等是否能達(dá)到較的標(biāo)準(zhǔn),此為金標(biāo)試劑的質(zhì)量之重要的標(biāo)準(zhǔn)。

聯(lián)


主站蜘蛛池模板: 久久天天躁狠狠躁夜夜av浪潮 | 日韩国产精品无码一区二区三区| 成人网站精品久久久久| 性欧美俄罗斯乱妇| а√天堂资源中文在线官网| 欧美巨大黑人精品videos| 偷自拍亚洲综合在线| 久久无码中文字幕无码| 大胆欧美熟妇xxbbwwbw高潮了| 亚洲精品久久久久久成人| 99亚洲乱人伦aⅴ精品| 日日摸日日添日日碰9学生露脸| 无码欧美毛片一区二区三| 人妻系列av无码专区| 高清欧美性猛交xxxx黑人猛交| 西西人体大胆无码视频| 日本少妇高潮喷水视频| 夜夜夜夜猛噜噜噜噜噜| 中国少妇videos呻吟| 国产麻豆剧果冻传媒星空视频| 色婷婷亚洲一区二区综合| 美女疯狂连续喷潮视频| 欧美交换配乱吟粗大免费看| 亚洲国产成人久久综合三区| 无码精品人妻 中文字幕| 成人亚洲精品久久99狠狠| 亚洲精品成人av观看| 亚洲制服无码一区二区三区| 伊人久久大香线蕉综合bd高清| 国产成人无码a区在线| 伊人久久大香线蕉成人| 无遮挡边摸边吃奶边做视频| 久久久久青草线蕉亚洲麻豆| 国产亚洲精品久久久久久牛牛| 100禁毛片免费40分钟视频| 亚洲欧美v国产一区二区| 久久国产精品福利一区二区三区| 2020国产精品精品国产| 欧美人与禽zozzo性伦交| 亚洲乱码日产精品一二三| 成人午夜特黄aaaaa片男男|